获得条件性基因敲除小鼠后如何进行下一步繁殖？如何选择实验对照小鼠？
条件性基因敲除小鼠（也叫Flox 小鼠）是指在目的基因中含有成对的loxp 位点的小鼠，与Cre 工具小鼠交配后可在
特定的组织或细胞中敲除目的基因。
方案一
若Flox 小鼠与广泛表达或生殖细胞特异Cre 小鼠交配，则可以获得全身基因敲除的KO 小鼠，繁育流程如图所示。ES
打靶载体中筛选基因neo 在两个loxp 之间，不需要单独去neo，结构为5’ arm-loxp-flox-frt-neo-frt-loxp-3’ arm，直
接配生殖腺表达的Cre 可同时去除neo 基因。
图3. 由条件性基因敲除小鼠获得全身性基因敲除纯合子小鼠繁育流程。
方案二
若与组织特异性Cre 小鼠交配，则可以按照图4 所示流程进行繁殖，一般采用转入Cre 重组酶的flox 杂合子小鼠与
flox 杂合子小鼠交配的方式获得Cre 酶整合的flox 纯合子条件基因敲除小鼠。此时，一般选择同窝出生的Cre 酶未整
合的flox 纯合子小鼠作为实验对照组。
图4. 组织特异性基因敲除小鼠繁育流程1。
方案三
也可以采用图5 的方案提高实验组小鼠比例。
图5. 组织特异性基因敲除小鼠繁育流程2。
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